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带你走出HPLC和UHPLC色谱柱的十大误区【鸭脖娱乐】


本文摘要:色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、连接器、螺丝等构成,是装弹有相同互为借以分离出来混合组分的柱管,多为金属或玻璃制作,有直管形、盘管形、U形管等形状。

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色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、连接器、螺丝等构成,是装弹有相同互为借以分离出来混合组分的柱管,多为金属或玻璃制作,有直管形、盘管形、U形管等形状。色谱柱可分成填满柱和开管柱两大类,液相色谱一般来说皆使用填满柱,色谱柱的分离出来效果各不相同所自由选择的相同互为,以及色谱柱的制取和操作者条件。误区1空气不会完全吞噬一根HPLC色谱柱当色谱柱不与色谱仪相连的时候,用户须要保证色谱柱被抱住地密封。事实上,实际的应用于中是,即使柱的端部转入了少量的空气也不要紧。

因为当你将色谱柱相连到色谱仪上用于时,在系统初始冷却阶段,在很短的时间内空气就不会被溶剂冲刷掉。所以,不要因为色谱柱转入了空气而确认色谱柱已被损毁。误区2所有的C18(L1)色谱柱都是一样的美国药典委员会(USP)研发了一种分类系统,用来对每种类型的键合相柱展开分类。

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由于C18色谱柱是一种广泛应用的色谱柱,故该系统将其称作“L1”。惜意外的是,约有800种以上的L1流向了市场,因此,事实证明这个系统是不可信的,是一个令人困惑的系统。

因为每种商品化的C18色谱柱,虽然某种程度是搭配硅胶作为基体,但各自都有自己特定的填料键合制备工艺,因此色谱性能也不完全相同。譬如,有的生产厂商使用十八烷基一氯硅烷键合试剂和较低表面积的硅胶(闻图一所必),而其它一些厂家使用同一硅烷试剂但搭配了表面积更高的硅胶基体。这两种C18柱展现出的色谱性能有所不同,后者C18相同相的键合比例小于前者。

较低的相同相键通比率,表面并未反应的硅醇基较多,有时混合保有机理起主要起到。某些色谱柱生产商用于二氯硅烷和三氯硅烷作键通试剂,将键合相聚合反应构成一较厚的具备有所不同蔓延特性的疏水层。

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为使键合后硅胶表面并未反应的硅醇基比例减少,有些生产商用小分子的硅烷试剂(如三甲基氯硅烷)封尾。硅醇基是在中性条件下测量碱性物质时造成色谱峰扯尾的原因之一,有些生产厂家,更进一步的作法是使用第二种小分子硅烷展开双封尾工艺,以获取一个更为惰性(上言水性)的硅胶表面。另外有些生产商使用聚合物基体材料展开C18键合,生产出有一种几乎有所不同的C18填料,但依然被归类到“L1”。还有厂家使用反应性能有所不同的硅烷化试剂organoalkoxysilanes,生产出有一种与氯硅烷反应产生的有所不同的C18相同互为。

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误区3鼓吹相色谱柱不可以用于纯水互为这个误会只不过是源于有些用户在用于较低有机溶剂含量或者纯水作为反相色谱柱的流动相时,再次发生了又称互为坍塌的现象,所以大家就指出反相色谱柱不可以用于纯水互为。许多色谱工作者都被互为坍塌现象和保有时间偏移现象后遗症着,甚至早已丧失了希望找寻解决问题途径的冷静。

因此,他们索性就指出不应当在鼓吹相色谱柱中运营水含量很高的流动互为。然而,事实上市售的反相色谱柱(如极性映射和极性封端柱)都是具备水浸润性的,其表面特性是容许用于纯水的,而会造成坍塌或者保有时间移位。


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